产品: 质粒DNA中量抽提试剂盒(磁珠法)|高纯度高收率用时短
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详细介绍
【产品介绍】
磁珠法质粒DNA中量抽提试剂盒是苏州北科纳米生物科技有限公司最新研制的一种细菌质粒DNA中量抽提试剂盒。本产品将磁性纳米分离技术和细菌细胞的SDS碱裂解法结合可以简单、快速、低成本的从重组大肠杆菌培养物中提取高质量的质粒DNA。在离心力的作用下细胞碎片和SDS复合物沉淀下来。在一定的条件下磁珠能很好的吸附存在于上清中的质粒DNA,其他杂质如蛋白质、盐离子等通过洗涤被除去。当条件改变时,磁珠释放吸附的质粒DNA。可在45分钟内从20-40ml的Luria Broth (LB)培养基中回收出多达300 μg的质粒DNA。请注意,实际得率和最佳的培养物体积取决于质粒和培养基。由本试剂盒抽提得到的质粒纯度高,OD260/OD280比值一般为1.7~1.9之间,OD260/OD230比值大于2.0,可直接用于转化、DNA测序、PCR、基于PCR的突变、体外转录和酶切等后续实验。
【特点】
l 从20-40 ml过夜培养菌液(OD600 = 2.0)中可获得超过300 μg的质粒DNA;
l 与同类产品相比,提取效率更高,获得质粒的纯度更高;
l 与柱式法相比,可大大减少离心次数,获得完整性更好的质粒;
l 可以同时处理多个样品,实现质粒提取的高通量化和自动化。
【保存方法及注意事项】
请将试剂盒中的Beads和RNase A置于2-8℃保存,其余试剂室温保存,有效期详见包装。
l 严禁冰冻、离心。冰冻、离心可能会对磁珠造成不可逆的损害。
l 磁珠长期放置后会聚集成团,从而使磁珠表面积减小,降低样品回收得率,使用前一定要涡旋振荡彻底混匀磁珠(通常需涡旋振荡20秒)。
【试剂盒组成】
组分 |
10次 |
保存 |
Resuspension solution |
40 ml |
2-8℃ |
Lysis buffer |
40 ml |
2-8℃ |
Neutralization solution |
40 ml |
2-8℃ |
Wash buffer |
75%乙醇(用户自备) |
2-8℃ |
Elution buffer |
10 ml |
2-8℃ |
bead |
4 ml |
2-8℃ |
RNase A |
2 ml |
2-8℃ |
异丙醇 |
用户自备 |
常温 |
DNA浓度及纯度检测 :(1)得到的基因组DNA片段大小与样品保存时间、操作过程中剪切力等因素有关,所得DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度和纯度。 (2)DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260=1相当于大约50ng/ul双链DNA,40ng/ul单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7~1.9,如果洗脱时使用去离子水,比值会偏低,因为pH和离子会影响吸光度,并不表示纯度低。
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