ACS Nano | 纳米钻石介导的纳米抗体和免疫刺激 RNA 的靶向递送，用于乳腺癌治疗

三阴性乳腺癌（TNBC）是一种具有侵袭性的亚型，缺乏明确的分子靶点，特点是复发和转移率较高。表皮生长因子受体（EGFR）异常激活会促进肿瘤进展和 TNBC 免疫逃避。尽管 EGFR 抑制剂可以暂时抑制肿瘤生长，但代偿性信号传导和治疗耐药性限制了其疗效。需要调节多途径同时增强抗肿瘤免疫的治疗策略，选择性纳米颗粒递送提供了提高效力同时减少非特异性毒性的方法。我们开发了 ND-dsRNA-VHH，一种生物相容性的碳基纳米材料平台，能够协同递送 EGFR 特异性纳米抗体（VHHs）和免疫刺激双链 RNA——多氨酰胺-多胞苷酸（poly（I：C））。优化的 ND 表面化学支持高效的 dsRNA 载荷和稳定的 VHH 结合，产生具有 EGFR 结合特异性和血清稳定性的纳米颗粒。后续研究表明，ND-dsRNA-VHH 诱导细胞凋亡、氧化应激和免疫原性细胞死亡，进而激活树突状细胞。进一步评估显示，ND-dsRNA-VHH 治疗可减少肿瘤生长，延长生存期，增加 T 细胞浸润，并将肿瘤微环境转变为更具促炎性和免疫活性状态。该平台的模块化特性支持配体交换，使其在 EGFR 驱动的恶性肿瘤（如胶质母细胞瘤）中更广泛地应用，凸显了其通过 ICD 诱导和免疫启动相结合提升免疫治疗的潜力。

该研究以题为“Nanodiamond-Mediated Targeted Delivery of Nanobodies and Immunostimulatory RNA for Breast Cancer Therapy”发表在ACS Nano上。

图1

ND−dsRNA−VHH 纳米偶联物组装及免疫调节机制示意图 (A) ND−dsRNA−VHH 纳米偶联物的组装。纳米金刚石（NDs）与双链 RNA（dsRNA，poly(I:C)）共同负载，并在表面功能化 VHH 纳米抗体，实现靶向递送及高效内体摄取。(B) 通过凋亡和免疫调节的多模式抗肿瘤反应。ND−dsRNA−VHH 复合物通过受体介导的内吞作用进入细胞，并与胞内模式识别受体（PRRs）结合，包括 TLR3、PKR、MDA5 和 RIG-I。这些通路的激活促进肿瘤细胞凋亡、细胞因子分泌及 I 型干扰素释放。由此产生的炎症微环境驱动先天免疫激活并增加肿瘤免疫原性，最终促进对异质性肿瘤的先天免疫和适应性免疫反应的激活。

总结

三阴性乳腺癌因为缺少有效的治疗靶点，复发和转移风险都很高，临床上一直很棘手。最近一项研究设计了一种基于纳米金刚石的递送平台，把靶向EGFR的纳米抗体和免疫刺激RNA（poly(I:C)）组合到一起。这个纳米复合物能精准识别肿瘤细胞表面的EGFR，带着药物进入细胞内部，激活TLR3等先天免疫通路，诱导肿瘤细胞发生免疫原性死亡——也就是让死掉的癌细胞释放出一系列危险信号，反过来唤醒周围的免疫系统。体外实验显示，它显著提升了树突状细胞的成熟度和巨噬细胞向M1型极化的比例，同时促进了CD8+ T细胞的浸润。

在4T1小鼠乳腺癌模型中，这种治疗不仅抑制了原位瘤的生长，还延长了生存期。更值得一提的是，在术后残留模型中，纳米复合物与PD-L1抗体联用把60天生存率从0%提到了60%，肺转移结节也几乎被清除。整个平台还有一个好处就是模块化——换掉纳米抗体就能适配其他EGFR高表达的肿瘤，比如胶质母细胞瘤。虽然目前还处于临床前阶段，但这项研究为破解免疫“冷”肿瘤的耐药问题提供了一种新思路。

参考文献：

DOI: 10.1021/acsnano.5c21823